Первым этапом микробиологической диагностики инфекционных болезней является выбор
материала для исследования, обусловленный патогенезом заболевания.
Различают следующие методы микробиологической диагностики бактериальных инфекций:
бактериоскопический, бактериологический, биологический, серологический, аллергический.
Бактериоскопический, бактериологический и биологический методы направлены на обнаружение
возбудителя в исследуемом материале. Бактериоскопический метод заключается в
приготовлении мазка из исследуемого материала, окраске его (иногда изучают возбудителя в
живом состоянии) и микроскопии. Данный метод находит ограниченное применение, так как
может быть использован лишь при наличии каких-либо морфологических или тинкториальных
особенностей у возбудителя и достаточном содержании возбудителя в исследуемом материале.
Чаще всего бактериоскопический метод применяют как ориентировочный.
Основным методом диагностики инфекционных заболеваний является бактериологический
метод. Его применяют практически при всех бактериальных инфекциях для установления
точного диагноза и нередко для назначения лечения, несмотря на продолжительность
исследования . от 3 до 5 дней (иногда до 2 мес). Бактериологический метод включает посев
исследуемого материала на питательные среды, выделение чистой культуры и ее
идентификацию. В том случае, если в исследуемом материале предполагается содержание
возбудителя в достаточном количестве, посев материала производят на плотные питательные
среды (для получения изолированных колоний). При незначительном содержании
микроорганизмов исследуемый материал прежде всего засевают на жидкие питательные среды --
среды обогащения. Идентификацию выделенной чистой культуры производят по
морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим, антигенным и токсигенным
свойствам (в зави-
симости от вида возбудителя). Определение перечисленных свойств позволяет установить вид
возбудителя. С эпидемиологической целью производят внутривидовую идентификацию
(эпидемиологическое маркирование) выделенной культуры: определяют ее фаговар, биовар и
т. д. Кроме того, для назначения рациональной химиотерапии, как правило, определяют
чувствительность выделенной культуры к антибиотикам.
При заболеваниях, вызванных условно-патогенными бактериями, необходимо определять
количество микроорганизмов в исследуемом материале.
Биологический метод направлен на обнаружение в исследуемом материале возбудителя или его
токсина. Метод заключается в заражении исследуемым материалом лабораторных животных с
последующим выделением чистой культуры возбудителя и ее идентификацией или определением
природы токсина.
Однако постановка микробиологического диагноза инфекционного заболевания возможна не
только с помощью выделения и идентификации возбудителя, но и при обнаружении
специфических антител к нему. Для этого используют серологический метод, заключающийся в
постановке реакций иммунитета. Антитела к возбудителю заболевания появляются, как
правило, к концу 1-й недели заболевания, с этого времени и используют названный метод. В
некоторых случаях серологический метод может быть направлен на выявление специфического
антигена непосредственно в исследуемом материале. В частности, для экспресс-диагностики
инфекционного заболевания применяют реакцию иммунофлюоресценции, позволяющую быстро (в
течение нескольких часов) выявить возбудителя в исследуемом материале.
И, наконец, аллергический метод направлен на выявление повышенной чувствительности
организма к специфическому аллергену, которым является возбудитель заболевания. Примером
этого метода является постановка кожно-аллергических проб. В основе метода лежит феномен
гиперчувствительности замедленного типа.
Применяют также молекулярно-генетические методы диагностики: ПЦР, гибридизация ДНК и др.
