Возбудитель дифтерии Corynebacterium diphtheriae (от coryne
— булава, diphthera — пленка) относится к роду Corynebacterium, семейству
Actinomy-сеае. Открыт в 1883
г. Т. Клебсом, выделен в чистом виде в 1884 г. Ф. Леффлером. Род
Corynebacterium включает также ложнодифтерийные бактерии и дифтероиды,
непатогенные для человека, обнаруживаемые на слизистых оболочках и кожных
покровах.
Морфология и тинкториальные свойства.
Дифтерийные бактерии — тонкие слегка изогнутые палочки длиной 3—5 мкм, шириной
0,3 мкм с характерным расположением в мазках: попарно, под углом друг к другу,
напоминая цифру V. Концы палочек имеют булавовидные утолщения, содержащие зерна
волютина (тельца Бабеша—Эрнста). Эти зерна, являющиеся запасными питательными
веществами, служат одним из дифференщиально-диагностических признаков при
идентификации дифтерийных палочек. Бактерии дифтерии грамположи-тельны,
неподвижны, не образуют спор, некоторые ытаммы имеют микрокапсулу. Для
возбудителя дифтерии характерен полиморфизм. Для окрашивания мазков дифтерийных бактерий применяют щелочной метиленовый
синий Леффлера и окраску по методу Нейссера для выявления зерен волютина,
которые приобретают синий цвет, выделяются на желтоватом фоне бактериальной
клетки, по полюсам. Зерна волютина можно наблюдать и с помощью люминесцентной
микроскопии.
Культивирование и ферментативные
свойства. Коринебактерии являются факультативными анаэробами. Для выделения
чистой культуры дифтерийных бактерий используют элективные питательные среды:
сывороточные и теллуритовые. При выращивании на скошенной поверхности свернутой
сыворотки уже через 8—12 ч появляется характерный рост — хорошо очерченные
мелкие и круглые колонии кремовато-желтого цвета. Культивирование на
теллуритовых средах дает возможность обнаруживать и дифференцировать бактерии
дифтерии по характеру роста: колонии типа gravis — серовато-черные, матовые с
радиальной исчерченностью и неровными краями, типа mitis — черные, гладкие,
выпуклые над поверхностью; бактерии типа intermedius образуют колонии мелкие,
блестящие, черные с прозрачными краями. Деление дифтерийных бактерий па три
типа (gravis — тяжелый, mitis — средний, intermedius — промежуточный)
обусловлено культуральными и биохимическими особенностями возбудителя. При идентификации возбудителя дифтерии определяют ферментативные свойства,
позволяющие дифференцировать его от других корииебактерий.
Антигенная структура и
токсинообразование. По антигенной структуре дифтерийные бактерии
неоднородны и делятся на 11 сероваров. Однако экзотоксин, продуцируемый
дифтерийными палочками и являющийся основным фактором патогенности, антигенно
тождествен у различных сероваров. Токсинообразование связано с состоянием
лизогении, т. е. токсигенность присуща только штаммам, содержащим умеренный
фаг, гены которого детерминируют способность клетки вырабатывать экзотоксин.
Элиминация фага ведет к потере токсинообразования.
Резистентность. Корииебактерий
дифтерии устойчивы к факторам окружающей среды, высыханию и могут долго
сохранять жизнеспособность, например, на мягких игрушках — до 3 мес.
Дезинфицирующие вещества (5% раствор карболовой кислоты, 1% раствор сулемы и
др.) убивают коринебактерии дифтерии в течение 1—10 мин. Температура 60 °С
приводит к их гибели в течение 10 мин, прямой солнечный свет — в течение
нескольких часов. Дифтерийные бактерии чувствительны к пенициллину, эритромицину, тетрациклину и
другим антибиотикам.
Патогенность для животных. К
дифтерийному экзотоксину чувствительны морские свинки. Токсигенность
коринебактерии определяется внутрикожным методом, позволяющим на одной морской
свинке изучить токсигенность нескольких штаммов. При подкожном введении
дифтерийных бактерий свинка погибает на 2—5-й день. На вскрытии обнаруживаются
резкое увеличение и гиперемия надпочечников — специфическое действие
экзотоксина.
Патогенез и клиника. Входными
воротами инфекции являются слизистые оболочки поверхности зева, дыхательных
путей, носоглотки и носа; реже процесс локализуется на слизистых глаз, наружных
половых органах у девочек, раневой поверхности кожи. На пораженных слизистых
оболочках развивается дифтеритическое воспаление, сопровождающееся образованием
фибринозной пленки в виде серовато-белых наложений, захватывающих не только
эпителий, но и подлежащую соединительную ткань. Интоксикация организма связана
с экзотоксииом, циркулирующим в крови, который вызывает поражение сердечно-сосудистой
системы, нервной системы, надпочечников и почек. Инкубационный период длится 2—7 дней. Заболевание различается по форме —
локализованная, токсическая и распространенная дифтерия и по течению — легкое,
среднее и тяжелое.
Иммунитет. После заболевания
длительное время сохраняется антимикробный и антитоксический иммунитет. Грудные
дети дифтерией не болеют, так как у них имеется пассивный иммунитет от матери.
Наиболее восприимчивы дети в возрасте от 1 года до 5—6 лет. Для выявления
антитоксического противодифтерийного иммунитета используется внутрикожная проба
Шика. У детей, восприимчивых к дифтерии, на предплечье в месте введения малых
доз дифтерийного токсина через 48 ч появляются покраснение и инфильтрат, что
свидетельствует об отсутствии антитоксинов в крови. Лабораторная диагностика. Для бактериологического исследования берут материал из-под
пленки, а если ее нет (или при обследовании на носительство) — слизь из зева и
носа двумя тампонами раздельно. Предварительную бактериоскопию мазка с тампона
проводят только по требованию лечащего врача. Посев делают на избирательные
питательные среды параллельно: на свернутую сыворотку и среду Клауберга.
Наличие роста и обнаружение при окраске по Леффлеру коринебактерии с
характерной морфологией и расположением позволяют проводить дальнейшую
идентификацию по биохимическим, антигенным свойствам и определению токсигенности.
Последнее исследование имеет особенно важное значение при изучении культур,
выделенных от бактерионосителей. Носители чаще всего выделяют нетоксигенные
штаммы; заболевание же вызывают только токсигенные дифтерийные палочки. Определяют токсигенность по методу Оухтерлони — преципитацией в агаре.
Выделенную культуру в виде «бляшки» или штрихом засевают на поверхность
агаровой среды в чашке Петри рядом с полоской фильтровальной бумаги,
пропитанной дифтерийной антитоксической сывороткой (расположенной по диаметру
чашки). Если культура токсигенна, то через 24—48 ч диффундирующий в питательную
среду токсин в местах, где он «встречается» с сывороткой, также диффундирующей
в агар, образует линии преципитации белого цвета.
Эпидемиология. Источником инфекции
является боль» ной человек, реконвалесцент и носитель токсигенных штаммов
коринебактерий дифтерии. Наибольшее количество возбудителей выделяют больные с
ярко выраженной клиникой. Опасными источниками инфекции являются также больные
с атипичными формами, не распознанные и поэтому не госпитализированные. Возбудитель дифтерии выделяется от больного с капельками слизи при кашле и
чиханье, поэтому основной механизм передачи — воздушно-капельный.
Специфическое лечение и профилактика.
Главным в специфическом лечении всех форм дифтерии является своевременное
введение дифтерийной антитоксической сыворотки, действие которой направлено на
нейтрализацию циркулирующего в крови экзотоксина. Обязательно лечение
носительства токсигенных штаммов бактерий, которое проводится антибиотиками —
тетрациклином или эритромицином. Основой борьбы с заболеваемостью являются обязательные противодифтерийные
прививки всего детского населения вакциной АКДС, содержащей убитые коклюшные
бактерии, дифтерийный и столбнячный анатоксины. Поствакцинальный иммунитет
сохраняется в течение 4—5 лет.
| 
